：目的 将肝癌相关基因HTA进行克隆、表达并制备多克隆抗体，为进一步研究其作为肝癌导\r\n向治疗靶点的可行性及临床意义奠定基础。方法 应用RT-PCR技术，从人肝癌细胞系HepG2细胞中\r\n扩增得到HTA338-616cDNA，再将其克隆到原核表达载体pET21a(+)-MBP内，用IPTG诱导其在大肠杆菌\r\nBL21(DE3) 中表达。His-tag 磁珠纯化试剂盒纯化重组蛋白MBP-HTA，通过Western blot 和ELISA 方法\r\n检测重组蛋白的抗原性。将纯化的重组蛋白免疫BALB/c 小鼠制备多克隆抗体，并采用ELISA、Western\r\nblot 和免疫组化的方法检测抗体的灵敏度和特异性。结果 成功地构建了表达MBP-HTA 融合蛋白的\r\n原核表达质粒pET21a(+)-MBP-HTA。重组MBP-HTA融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)内得以高效表\r\n达，且以包涵体的形式存在。His-tag磁珠纯化试剂盒纯化和Western blot分析，得到了分子量约为52kDa\r\n的目的蛋白。获得了高效价的特异性多克隆抗体，经ELISA检测抗体的效价为1∶3200，用Western blot检\r\n测的效价为1∶400。免疫组织化学检测表明：肝癌组织中HTA 蛋白的阳性表达率明显高于正常肝组织\r\n(P <0.01)。结论 成功地制备出抗MBP-HTA多克隆抗体，该抗体有较高的效价和特异性；能用于免疫\r\n组织化学的检测，且HTA在肝癌组织中的阳性表达率明显高于正常肝组织。HTA蛋白有望成为肝癌导\r\n向治疗的潜在靶点。